大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 (ELISA)試劑盒
簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品名稱:大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 (ELISA)試劑盒主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T產(chǎn)品形狀:盒裝液體保存條件:2-8℃有效期:6個(gè)月檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)波長(zhǎng):450nm研究領(lǐng)域:神經(jīng)生物學(xué),新陳代謝,免疫學(xué),其它研究運(yùn)輸:快遞送貨上門,運(yùn)輸保存條件苛刻產(chǎn)品可單獨(dú)送貨上門
- 產(chǎn)品型號(hào):MLXK3046
- 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間:2023-02-21
- 訪 問(wèn) 量:388
大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 (ELISA)試劑盒 |
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在 ELISA 中,選擇各種實(shí)驗(yàn)條件很重要,包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)都可以用作固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、纖維素等。可以是孔板、試管、珠子等形式,常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。無(wú)論是何種載體,使用前都可以進(jìn)行篩選:包被等量的抗原,在相同的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:當(dāng)抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度好,一般要求pH在9.0~9.6之間在吸附過(guò)程中。吸附溫度、時(shí)間和蛋白質(zhì)的量也有一定的影響,一般4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最佳濃度需要滴定:即在包被不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)后,在其他測(cè)試條件相同的情況下觀察陽(yáng)性樣品的OD值.選擇 OD 值最高、蛋白質(zhì)含量最少的濃度。對(duì)于大多數(shù)蛋白質(zhì),通常為 1-10 μg/ml。
(3)酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法滴定初始效價(jià)(見(jiàn)酶標(biāo)抗體部分)。然后固定其他條件或采用“方陣法"(包被材料、待測(cè)樣品對(duì)照品和酶標(biāo)抗體處于不同稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中準(zhǔn)確滴定工作濃度。
(4)酶底物和氫供體的選擇:氫供體的選擇要求便宜、安全、顯色反應(yīng)明顯,但本身是無(wú)色的。一些供氫體(如OPD等)具有潛在的致癌作用,應(yīng)予以保護(hù)。有條件的應(yīng)選用非致癌、高靈敏度的供氫體,如TMB、ABTS等,都是比較滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿停止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間為10-30分鐘。底物溶液必須新鮮配制,特別是在使用前應(yīng)立即加入 H2O2。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
12. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
同產(chǎn)品展示:
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