大鼠apelin  12 （ELISA）試劑盒

預(yù)防措施

ELISA試劑盒檢測(cè)時(shí)的注意事項(xiàng)

1. ELISA 實(shí)驗(yàn)的一般規(guī)則

1、為保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%?？捎盟碗娮犹炱綔y(cè)定。但最好請(qǐng)專(zhuān)業(yè)人士糾正。

2、可配20ul、50ul、100ul、1000ul各一支槍。吸出不同的液體后，更換移液器吸頭。即使在吸氣標(biāo)準(zhǔn)時(shí)。

3. 實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，讓所有試劑回到室溫，使結(jié)果更穩(wěn)定。

4. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，基板應(yīng)避光。

5、用槍吸液體時(shí)，速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡，吸不準(zhǔn)。

6、吸液時(shí)，請(qǐng)使用范圍接近所需量的槍?zhuān)詼p少誤差。

7、在酶標(biāo)孔中加入液體時(shí)，避免吸頭與孔內(nèi)液體接觸，使吸頭上的液滴與孔壁接觸，液滴自然流下。

8. 加完所有液體后，平行輕輕搖動(dòng)桌面上的ELISA板30秒，使液體混合。也可以使用酶標(biāo)儀的搖動(dòng)功能。

9. 溫水浴時(shí)，用不干膠或膠帶紙將ELISA板密封，防止水分蒸發(fā)。

10、洗板時(shí)，每次加入洗劑后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更*。如果沒(méi)有洗板機(jī)，請(qǐng)?jiān)诔ヒ后w后在報(bào)紙或羊毛紙上將盤(pán)子拍干。

11、當(dāng)洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水配制PH7.4，0.02M磷酸鹽緩沖液，加入0.1% Tween 20作為洗液。加入1/1000的后可長(zhǎng)期保存。

12、基材對(duì)光敏感，使用前應(yīng)立即準(zhǔn)備。

13、檢測(cè)前，打開(kāi)酶標(biāo)儀，使其穩(wěn)定10分鐘以上。

14、底物有一定毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免。

15、待測(cè)樣品應(yīng)澄清，否則會(huì)影響結(jié)果。

16、溫水浴時(shí)間應(yīng)符合試劑盒規(guī)定。

17、盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

18、結(jié)果有問(wèn)題的樣品，應(yīng)采用其他方法確認(rèn)。

可以總結(jié)為四個(gè)方面：

1. 用于定位各種細(xì)胞內(nèi)成分的免疫酶染色。

2.研究抗酶抗體的合成。

3. 出現(xiàn)少量免疫沉淀。

4、體液中抗原或抗體成分的定量檢測(cè)。

二、以下是我公司ELISA產(chǎn)品存在的問(wèn)題及解決方法

1、加入反應(yīng)終止液后，無(wú)吸光度值或吸光度值偏低。

一個(gè)。原因：沒(méi)有添加酶標(biāo)。

解決方法：請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行。

灣。原因：套件內(nèi)的物品未全部歸還。

解決方案：在繼續(xù)之前，確保試劑盒中的內(nèi)容物已恢復(fù)到溫度。

C。原因：室溫太低。

解決方法：如果室溫過(guò)低（<19°C），請(qǐng)?jiān)诓襟E4中適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間。

d。原因：未使用套件的清洗液進(jìn)行清洗。

解決方案：請(qǐng)使用套件中提供的清潔液進(jìn)行清潔。

e.原因：套件已過(guò)期。

解決方法：請(qǐng)更換還在有效期內(nèi)的套件。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性差或平行度差。

一個(gè)。原因：孵化位置沒(méi)有很好的避光或氣流干擾。

解決方案：確保孵化位置既不透光也不通風(fēng)（例如在抽屜內(nèi)）。

灣。原因：操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

解決方法：請(qǐng)熟練后操作。

C。原因：微孔之間相互污染。

解決方法：加樣時(shí)注意不要濺出氣孔，以免污染其他氣孔。

d。原因：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或酶標(biāo)添加量不一致。

解決方案：請(qǐng)使用經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的移液器，并確保它與吸頭良好貼合。

e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。

解決方案：添加樣品或試劑時(shí)，吸頭不應(yīng)接觸微孔。

F。原因：洗版過(guò)程出現(xiàn)問(wèn)題（如管道堵塞，洗版后未立即進(jìn)行下一步）。

解決方法：請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)的洗滌過(guò)程，洗完后立即進(jìn)行下一步。

3.吸光度值都很高（或者線(xiàn)性度不夠陡峭）。

一個(gè)。原因：室溫過(guò)高（>25℃）。

解決方法：如果室內(nèi)溫度不能降低，請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4中的孵育時(shí)間。

灣。原因：底物溶液被污染。

解決方法：如果發(fā)現(xiàn)底物溶液呈淡藍(lán)色，請(qǐng)勿使用。

C。原因：反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

解決方法：請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。

d。原因：酶標(biāo)儀污染了盒內(nèi)其他試劑。

解決方法：用過(guò)的吸頭應(yīng)立即丟棄，以免試劑相互污染。所有與試劑（尤其是酶標(biāo)記物和底物溶液）接觸過(guò)的容器都應(yīng)立即清洗。 （先用漂白劑浸泡，再用清水沖洗，確保無(wú)殘留）

4. 陰性標(biāo)準(zhǔn)的吸光度低于陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

一個(gè)。原因：微孔中的試劑沒(méi)有充分混合。

解決方法：加入試劑后，輕敲盤(pán)子使其充分混合。

灣。原因：洗版過(guò)程有問(wèn)題（同2-f.）。

解決方法：請(qǐng)參考2-f。

C。原因：加樣量或酶標(biāo)量不一致。

解決方法：請(qǐng)參考2-d。

該IBL試劑盒可用于小鼠血清、EDTA血漿和細(xì)胞上清液中IL-6的定量檢測(cè)

同產(chǎn)品展示：